Online Peptide Fractionation Using a Multiphasic Microfluidic Liquid Chromatography Chip Improves Reproducibility and Detection Limits for Quantitation in Discovery and Targeted Proteomics.
Christoph Krisp, Hao Yang, Remco van Soest, and Mark P Molloy
Molecular & Cellular Proteomics (2015) 14: 1708-1719.
该研究展现了一种用于提高实验重现性的分离方法,实验重现性是高通量比较蛋白组学中经常要求的。LC 芯片使得从发现研究向靶向研究的切换变得快捷且便利,并且该方法有利于标准化不同实验室间的组学分析结果。
在DDA MS/MS分析中,癌症细胞裂解液中95%被鉴定的肽段都只出现在一个组分中,只有不到0.9%的肽段出现在两个组分中。利用预设时间的MRM(scheduled MRM)高分辨率质谱靶向检测,分析了173个血浆蛋白的503 个肽段。在该多相分离中,503个肽段定量结果的中位CV值为3.4 +/- 3%, 其中只有10个肽段的CV值大于15%。 利用多相LC 芯片联合非数据依赖的MS/MS分析3株甲状腺细胞,一共鉴定到3875个蛋白。你可以从 ProteomeXchange上获得这些数据。
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