Simultaneous Enrichment of Plasma Soluble and Extracellular Vesicular Glycoproteins Using Prolonged Ultracentrifugation-Electrostatic Repulsion-hydrophilic Interaction Chromatography (PUC-ERLIC) Approach
Esther Sok Hwee Cheow, Kae Hwan Sim, Dominique de Kleijn, Chuen Neng Lee, Vitaly Sorokin and Siu Kwan Sze
Molecular & Cellular Proteomics (2015) 14: 1657-1671.
该文章的作者研究了循环系统中的糖蛋白以及从损伤或者感染的宿主细胞或者组织中分泌出来的细胞外囊泡,它们是鉴定人类疾病状态的潜在生物标志物。该研究显示,通过PUC-ERLIC富集的糖蛋白,能够同时覆盖人类血浆(没有去除高峰度蛋白)中分泌的糖蛋白以及来自细胞外囊泡的糖蛋白。
在一次LC-MS/MS分析中,作者在人类血浆样品中鉴定了127个糖蛋白,包括599个特异性糖肽以及361个特异性糖基化位点。在不事先去除高峰度蛋白的情况下,PUC-ERLIC能够鉴定48个低丰度蛋白(pg/ml-ng/ml)。通过分析心脏病病人的血清,他们发现了一个心脏特异性重建的糖蛋白——LYVE1——该蛋白已经被报道参与心肌层的愈合。
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