Mass spectrometry-based absolute quantification reveals rhythmic variation of mouse circadian clock proteins
Ryohei Narumi, Yoshihiro Shimizu, Maki Ukai-Tadenuma, Koji L. Ode, Genki N. Kanda, Yuta Shinohara, Aya Sato, Katsuhiko Matsumoto, and Hiroki R. Ueda
PNAS (2016) 113, E3461, online: May 31, 2016
本研究观察了哺乳动物系统中的核心的生物钟蛋白质,并且基于SRM靶向蛋白组学技术对这些蛋白质进行了定量分析。本文作者应用了基于LC/MS的“同位素标记的无细胞产物定量(MS-QBiC)”法,该方法利用重组的无细胞蛋白合成系统,用于高通量的制备标准内参。
对小鼠进行2周的昼夜循环饲养后,收集小鼠肝脏,用120个QBiC 肽段,对6个时间点的样品进行了分析。在24小时的时间轴上,20个从小鼠肝脏中挑选的生物钟蛋白中,16个蛋白被成功定量,其中14个蛋白具有昼夜变化。该研究指出,单个时间点可以预测身体时间,表明每个昼夜节律的蛋白是人体身体时间检测的潜在生物标志物。 |