An application of mass spectrometry for quality control of biologicals: Highly sensitive profiling of plasma residuals in human plasma-derived immunoglobulin
Franck Limonier, Katleen Van Steendam, Genevieve Waeterloos, Koen Brusselmans, Myriam Sneyers, Dieter Deforce
Journal of Proteomics 152 (2017) 312-320
作者开发了基于质谱来对人血浆来源的免疫球蛋白中残留蛋白的定性、定量方法。免疫球蛋白Ig是被用于免疫缺陷相关疾病以及自身免疫疾病的治疗,而这些残留蛋白会引发一系列不良影响,这也是激起作者做这方面研究的动力。
这篇文章从相当宽的样品分级、采集策略、重复以及样品的范围中,确定最佳的方案。他们的结论是,使用结合了组合肽段配体库(CPLL)的beads来富集低丰度蛋白,是检测这些残留蛋白的首选方法。实验采用的是标准的bottom-up LC/MS/MS和数据库检索流程用于定性,采用label-free的方法进行定量。
作者检测了5种不同的Ig产物,并且发现了70种不同的血浆残留蛋白。他们强化实验的结果是:在Ig中1ng/mg的检出水平(远远低于在体内模型中3ng/mg的血栓形成量)具有作为QC的潜力。
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