Mass spectrometry identification of biomarkers in extracellular vesicles from Plasmodium vivax liver hypnozoite infections
Melisa Gualdrón-López, Miriam Díaz-Varela, Gigliola Zanghi, Iris Aparici-Herraiz, Ryan W.J. Steel, Carola Schäfer, Pol Cuscó, Vorada Chuenchob, Niwat Kangwangransan, Zachary P. Billman, Tayla M. Olsen, Juan R. González, Wanlapa Roobsoong, Jetsumon Sattabongkot, Sean C. Murphy, Sebastian A. Mikolajczak, Eva Borràs, Eduard Sabidó, Carmen Fernandez-Becerra, Erika L. Flannery, Stefan H.I. Kappe, Hernando A. del Portillo
Molecular & Cellular Proteomics, August 24, 2022, in press
作者查找潜在的蛋白质生物标志物,用以表明肝脏催眠虫的存在,这是一种休眠的疟疾寄生虫,可以重新激活并引起疟疾疾病的复发。他们的方法是在体内产生P. vivax疟原虫感染,并探索来自催眠虫感染的肝细胞的细胞外囊泡(EVs)的蛋白质含量。
在这项研究中使用了五组不同的移植人肝细胞的小鼠:未感染对照组、由蚊虫叮咬感染P. vivax的小鼠、由静脉注射感染的小鼠、感染后使用MMV048和Tafenoquine治疗的小鼠。
血浆中的胞外囊泡使用体积排阻色谱法(SEC)分离,然后蛋白经过酶解,再通过LC-MS/MS DDA模式进行分析。数据使用P. vivax、人和小鼠的混合库进行检索。蛋白相对定量使用每个样本中的预估丰度计算,具体计算方法为取每个蛋白中排名前三的肽段积分面积的平均值。
SEC分离的组份包含来自三个物种的蛋白:159个人的蛋白,331个小鼠蛋白,66个P. vivax蛋白。通过比较不同实验组P. vivax疟原虫蛋白质的比例,筛选与EVs相关的催眠虫特异性蛋白,发现了13个潜在的候选蛋白。
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