Mapping the Human Chondroitin Sulfate Glycoproteome Reveals an Unexpected Correlation Between Glycan Sulfation and Attachment Site Characteristics
Fredrik Noborn, Jonas Nilsson, Carina Sihlbom, Mahnaz Nikpour, Lena Kjellén, Göran Larson
Mol Cell Proteomics (2023) 22, 100617
作者开发了一种方法来确定人类硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)的核心肽序列和结合位点,CSPGs 由与各种核心蛋白结合的硫酸软骨素(CS)多糖组成。
对含有 CSPG 的样本进行胰蛋白酶消化,然后使用强阴离子交换色谱法富集 CS 糖肽。 将富集的糖肽与软骨素酶 ABC 培养,使 CS 多糖分子解聚。 这些过程使肽和 6-18 聚糖结构仍然附着在肽上。
样品通过 LC-MS/MS 进行分析,数据库搜索包括可变修饰设置,以确定[HexA(-H2O)GalNAcGlcAGalGalXyl-O-]的剩余 6 聚体结构上是否附着 0、1 或 2 个硫酸根或磷酸根。 这项工作已经完成,其 分析结果表明,可以确定 21 个已知的 CSPG 和 5 个新的 CSPG,同样的分析也适用于 8-18-mer 蛋白。 对这些结果的统计分析显示,CS 的硫酸化程度与结合基团的酸度有关。
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