A snapshot of the Physcomitrella N-terminome reveals N-terminal methylation of organellar proteins
Sebastian N. W. Hoernstein, Andreas Schlosser, Kathrin Fiedler, Nico van Gessel, Gabor L. Igloi, Daniel Lang & Ralf Reski
Plant Cell Reports, 43, 250 (2024)
作者利用来自24个不同实验的蛋白质组数据,研究了泥炭藓中蛋白质N端乙酰化和甲基化。泥炭藓是一种用途广泛的模式生物,广泛应用于基础研究,也可用作重组生物制药的生产平台。
这24个实验涵盖了多种组织和处理类型。在每个实验中,富集N端肽段,通过还原性二甲基化阻断游离氨基酸,并利用蛋白酶解去除内部肽段。LC-MS/MS分析后,用Mascot搜索谱图并导入到Scaffold 5中。作者使用严格筛选条件(肽段 FDR≤0.08 %,蛋白质 FDR ≤0.4%),总共鉴定到了 11,533 个蛋白 N 端,对应 4517 个蛋白。在鉴定出的 N-末端中,约 25% 被乙酰化,4% 被甲基化或带有焦谷氨酸。这些新数据可用于优化计算靶向预测器并靶向定位定制的蛋白融合体。
一个意外发现是质体和线粒体蛋白的N端单甲基化,影响N端的丙氨酸、丝氨酸以及甲硫氨酸。作者提出PpNTM1(P. patens alpha N端蛋白甲基转移酶1)可能是质体、线粒体和细胞质中蛋白质甲基化的候选酶。
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